分光光度法测定果蔬中的亚硝酸盐含量PPT
实验目的本实验旨在通过分光光度法测定果蔬中的亚硝酸盐含量,了解其在不同种类果蔬中的分布情况,为评估果蔬的安全性和质量提供依据。实验原理分光光度法是一种基于...
实验目的本实验旨在通过分光光度法测定果蔬中的亚硝酸盐含量,了解其在不同种类果蔬中的分布情况,为评估果蔬的安全性和质量提供依据。实验原理分光光度法是一种基于物质对光吸收的特性进行定量分析的方法。亚硝酸盐在特定波长下的光吸收有明显的特征,因此可通过分光光度计对其进行定量分析。具体而言,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应,生成的重氮化合物与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合成紫红色化合物,该化合物在540nm处有最大吸收峰,因此可通过测定该波长下的吸光度来定量亚硝酸盐的含量。实验步骤1. 试剂准备(1)对氨基苯磺酸溶液:称取50g对氨基苯磺酸,溶解于100mL水中。(2)N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液:称取0.5g N-1-萘基乙二胺盐酸盐,溶解于100mL水中。(3)亚铁氰化钾溶液:称取10g亚铁氰化钾,溶解于100mL水中。(4)乙酸锌溶液:称取20g乙酸锌,溶解于100mL水中。(5)亚硝酸钠标准溶液:准确称取0.1000g亚硝酸钠,加水溶解并定容至100mL,得到1mg/mL的亚硝酸钠标准溶液。2. 样品处理(1)将果蔬样品洗净,晾干表面水分。(2)称取10g样品,加入捣碎机中,加入适量乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液,捣碎成匀浆。(3)将匀浆转入50mL容量瓶中,加入2.5mL对氨基苯磺酸溶液,混匀。(4)静置30min后,加入N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液5mL,混匀。(5)用去离子水定容至50mL,静置15min后,用滤纸过滤,收集滤液备用。3. 标准曲线绘制(1)分别吸取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL的亚硝酸钠标准溶液,加入50mL容量瓶中。(2)分别加入2.5mL对氨基苯磺酸溶液,混匀。(3)静置30min后,加入5mL N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液,混匀。(4)用去离子水定容至50mL,静置15min后,用分光光度计在540nm处测定吸光度。(5)以吸光度为纵坐标,亚硝酸钠含量为横坐标绘制标准曲线。4. 样品测定(1)将收集的滤液转移到50mL容量瓶中。(2)用去离子水定容至刻度线,混匀。(3)用分光光度计在540nm处测定吸光度。实验结果与分析通过对比标准曲线和样品的吸光度值,可以计算出果蔬中亚硝酸盐的含量。一般来说,亚硝酸盐在果蔬中的含量因种类而异,且与其生长环境、存储条件等因素有关。通过本实验的结果可以了解不同种类果蔬中亚硝酸盐含量的分布情况,为评估果蔬的安全性和质量提供依据。